Обобщая полученные в научных исследованиях, проведенных в НИИАГ им. Д. О. Отта СЗО РАМН, данные можно заключить, что при изоиммунизации суммарный титр антиэритроцитарных антител нарастает в динамике беременности, достигая максимальных значений в третьем триместре. На фоне тяжелой аллоиммунизации самое значительное нарастание суммарного титра наблюдается после 28-й недели. При этом тяжесть сенсибилизации у беременных зависит от паритета и наличия отягощенного гемолитической болезнью плода и новорожденного анамнеза у матери. При этом, чем выше суммарный титр антиэритроцитарных антител в крови матери, тем чаще развивается у плода анемический синдром, однако степень его тяжести от высоты титра не зависит. Подобная зависимость не обнаружена у новорожденных этих женщин.
В настоящее время суммарный титр антиэритроцитарных антител принято определять всем резус-отрицательным беременным, имеющим иммуноконфликтный брак, в основном, с целью выявления у них самого факта сенсибилизации.
Всем беременным при первом обращении к врачу определяют группу крови и резус-фактор, даже если в жизни пациентки подобное исследование уже проводилось, и она имеет его заключение. При выявлении у беременной резус – отрицательной крови или О (I), А (II) или В (III) группы крови следует определить группу и резус-принадлежность крови отца для решения вопроса о принципиальной возможности развития иммуноконфликтной беременности.
Для исключения ошибок в определении этих показателей всем беременным исследования повторяют в 28–30 недель. При несовпадении результатов первого и повторного исследования кровь направляют на исследование в централизованную лабораторию или на станцию переливания крови.
Первичное определение группы крови проводят моноклональными антителами или стандартными изогемагглютинирующими сыворотками. Подтверждающее исследование проводят в лаборатории перекрестным способом на плоскости или агглютинацией в геле. Заключение о групповой принадлежности делают на основании первичного и подтверждающего исследования.
Резус-принадлежность крови беременных определяют двумя сериями реактивов анти-D-следующими методами: методом в пробирках без подогрева с использованием универсального реагента анти-D, методом агглютинации на плоскости с применением моноклональных антител, методом конглютинации в пробирках с желатином или 33 % полиглюкином, гелевым методом, антиглобулиновым тестом с использованием сыворотки анти-D (реакцией Кумбса).
В трудно диагностируемых случаях определения резус-принадлежности крови проводят непрямой антиглобулиновый тест. Резус-принадлежность крови беременных, имеющих слабый антиген D (по результату, выраженному в крестах), считают положительной.
Одновременно с определением групповой и резус-принадлежности крови проводят исследование антител к антигенам эритроцитов системы Резус и другим клинически значимым системам антигенов эритроцитов. Титрование антител проводят одним из методов: антиглобулиновым тестом, гелевым тестом или методом с применением 10 % желатина. Исследование проводят независимо от резус-принадлежности крови беременной.
Все беременные после первичного исследования на наличие антител распределяются на две группы: сенсибилизированные и несенсибилизированные. Повторные исследования целесообразно проводить в одной лаборатории одним и тем же методом.
Беременным, имеющим D-отрицательную принадлежность крови, у которых при первом обращении в консультацию антитела не были выявлены, повторное их исследование проводят в 28–30 недель для решения вопроса о целесообразности проведения первого этапа иммунопрофилактики. Такой подход оправдан, если на более ранних этапах беременности отсутствуют акушерские или экстрагенитальные факторы риска развития сенсибилизации, требующие досрочного повторного определения наличия антител.
Если скрининг антител дает положительный результат, то величина титра антител, полученная при первом исследовании, рассматривается как базовая. Существенно напомнить, что для оценки тяжести заболевания у плода и прогноза исхода беременности у сенсибилизированной женщины информации о суммарном титре антител, даже в случае его высокой величины, недостаточно.
У сенсибилизированных беременных проводят идентификацию антител с определением субклассов. Сроки исследования антител зависят от специфичности выявленных антител.
Беременным, сенсибилизированным к антигенам системы Резус или имеющим клинически значимые антитела к антигенам других систем, контроль титра антител до 32 недель беременности проводят 1 раз в 4 недели. После 32 недель контроль титра проводят 1 раз в 2 недели.
Контроль титра антител к антигенам эритроцитов системы АВО проводят при первичном обращении и в 36 недель беременности для решения вопроса о необходимости досрочного ее прерывания. Тяжесть гемолитической болезни плода и новорожденного, обусловленной несовместимостью крови матери и плода по системе АВО, не коррелирует с величиной титра антител, поэтому отсутствует необходимость более частого его определения.
Беременным, у которых выявлены антиэритроцитарные антитела, не имеющие клинического значения в патогенезе иммунного конфликта во время беременности, динамику титра антител повторяют в 28–30 недель беременности для выявления клинически значимых антител, которые могут вырабатываться в более поздние сроки беременности.
В исследованиях, проведенных в НИИАГ им. Д. О. Отта СЗО РАМН, было выявлено, что приблизительно у половины всех сенсибилизированных беременных выявлялись только анти-D-антитела. В остальных случаях они определялись у беременных в сочетании с другими типами антиэритроцитарных антител. При этом анти-Е антитела у пациенток всегда выявлялись в сочетании с анти-С антителами.
Было показано, что у беременных, имеющих в крови анти-С антитела, при ультразвуковом исследовании патологические значения толщины плаценты определяются чаще, по сравнению с теми женщинами, у которых анти-С не выявляются. Кроме того, максимальная систолическая скорость кровотока в средней мозговой артерии плодов была выше у тех получавших внутриутробные трансфузии беременных, которые имели в крови анти-Е антитела, по сравнению с теми, у которых этих антител не было.
Была обнаружена тенденция к наличию прямой корреляционной зависимости между частотой выявления в крови беременных анти-С и анти-Е антител и частотой развития тяжелого анемического синдрома и гепатоспленомегалии у новорожденных. Кроме того, было доказано, что отечный синдром у новорожденных достоверно чаще выявлялся при обнаружении в крови матери анти-Е антител.
Полученные данные позволили заключить, что выявление в крови беременных изолированно или в сочетании анти-D, анти-С и анти-Е антител имеет умеренную прогностическую значимость в отношении развития у плодов и новорожденных тяжелой степени анемической формы аллоиммунного заболевания.
Клиническое значение для развития заболевания у плода и новорожденного имеют иммуноглобулины класса G (IgG). Однако если у беременной в крови выявляются IgM, то следует наблюдать их в динамике беременности, поскольку с увеличением ее срока в крови матери, особенно из группы риска по развитию аллоиммунного заболевания, могут появиться и IgG.
Кроме того, у беременных, имеющих группу крови О (I), А (II), В (III) и супруга с иной группой крови, проводят выявление IgG системы АВО.
В процессе идентификации антител крайне необходимо исследовать принадлежность антител матери к субклассам IgG и определить их концентрацию в крови беременной. В литературе имеются данные о том, что если в сыворотке крови матери присутствуют только IgG, антитела, то интенсивность гемолиза эритроцитов у плода и новорожденного будет прямо зависеть от суммарного титра антител. Если присутствуют только IgG3 антитела, то гемолиз не будет зависеть от титра антител. Кроме того, в литературе имеются указания, что наиболее тяжелая анемия развивается у плода в том случае, если в крови матери выявляются совместно IgG1 и IgG3.